三耀精细化工品销售（北京）有限公司

PC HILIC

HILIC 色谱柱

HILIC是Hydrophilic Interaction Chromatography的简称，即“亲水性相互作用色谱”。在HILIC模式下，通过键合极性官能团的固定相与反相模式常用的CH₃CN / H₂O系流动相的组合，来对亲水性化合物进行保留与分离，因此，HILIC是在HPLC的分离模式中最常使用的反相模式的反相，故也被称为“反反相模式”。PC HILIC色谱柱将构成细胞膜的成分作为官能团，对亲水性化合物的保留具有优势。

物性值

■PC HILIC

PC HILIC高效液相色谱柱使用说明书

在此，非常感谢您选购我公司的PC HILIC色谱柱。
PC HILIC采用了多孔球型硅胶基质表面键合磷酸胆碱(PC)的填料。
为了能够长期且稳定地使用PC HILIC色谱柱，请在熟读该使用说明书后进行正确使用。

色谱柱的使用

1) 强烈撞击可能会造成色谱柱劣化，请小心谨慎使用。
2) 请在压力指示为0时进行色谱柱的安装和拆卸。
3) 色谱柱最大使用压为20 MPa。

色谱柱的安装

1) 色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管的螺头(MALE NUT)。请确保装置的配管接头正确连接，并且锥箍的顶端已插入接头内侧（参照图1）。
2) 安装色谱柱之前，请将装置配管内的液体置换成所用的流动相。
※请确认色谱柱出厂时的溶剂（记录在色谱柱附带的报告中），并注意盐析现象等。
3) 请按照色谱柱标签上的箭头方向来安装色谱柱。

分析

流动相

1) PC HILIC采用HILIC模式进行分离，请使用CH₃CN/H₂O系作为流动相。一般CH₃CN的浓度在70%以上时可形成HILIC模式，同时，为了形成HILIC模式，H₂O的浓度至少要在3%以上。另外，流动相的缓冲溶液推荐采用在高浓度有机溶剂中也有高溶解性的醋酸铵或甲酸铵。
2) PC HILIC的流动相推荐最佳pH使用范围为3~7.5。可用pH范围是以保留时间和理论塔板数不会提早减少为评价基准的。
3) 请过滤（0.45 μm以下滤膜）流动相去除杂质后再进行充分脱气。
4) 为防止由异物导致的色谱柱入口处过滤筛板堵塞，建议使用线上过滤器。
5) 新色谱柱使用色谱柱报告中标示的流动相封存。若要置换成含无机盐的流动相，请注意置换程序，不要造成盐析出。
6) 以下使用方法一般会导致色谱柱劣化，故应避免此类操作。
频繁变更流动相的组成或直接变更为相溶性差的流动相
色谱柱入口压力的急剧变化
使用高粘度的流动相造成高柱压

样品溶液的配制

1) 请尽量将样品溶解在与流动相组成相同的溶剂中。
2) 若使用含水量高的溶剂，会造成分离能力降低。因此推荐使用含有机溶剂50%以上的溶液进行稀释。
3) 样品溶液的pH请不要超过色谱柱的可用pH范围。

色谱柱的保存

1) 请用附带的堵头密封，保存在温差小的阴冷处。
2) 若是一个月以上的长期保存，使用不含盐的溶剂冲洗后，用出厂时的溶剂置换并用附带的堵头密封，保存在温差小的阴冷处。

色谱柱的连接

请按照图1所示进行配管连接。若配管不匹配，特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管时，锥箍前端的长度（图1中的V）与尾端接头的长度（图1中的L）经常会不同，因而引发故障。
若L＞V，会产生死体积，甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象，并且分离变差。
若L＜V，由于锥箍无法密封，所以会导致漏液。
※ 频繁更换色谱柱，可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。这种情况下若进一步拧紧，螺母的头部可能会发生断裂。

图1 色谱柱的连接图

故障与对策

使用高效液相色谱法进行测定时所出现的问题，存在各种原因。但由于无法将其一一列举，故在此只说明色谱柱及其周边较容易出现的问题。